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- Prueba ELISA: ¿cuál es el principio?
Prueba ELISA: ¿cuál es el principio?
Definición: ¿que es la prueba ELISA?
La técnica de ensayo de inmunoabsorción enzimática vinculada - en inglés Enzyme-Linked Immuno Assay - o prueba ELISA es una prueba inmunológica que permite la detección o el ensayo de moléculas en una muestra biológica. Fue conceptualizado y desarrollado por dos científicos suecos, Peter Perlmann y Eva Engvall en la Universidad de Estocolmo en 1971.
Las moléculas analizadas por el método ELISA son generalmente proteínas. Y los tipos de muestras incluyen materiales biológicos fluidos (plasma, suero, orina, transpirantes), medios de cultivo celular o una proteína recombinante (proteína producida por una célula cuyo material genético ha sido alterado por recombinación genética) purificada en solución.
La prueba ELISA se utiliza principalmente en inmunología para detectar y / o medir la presencia de proteínas, anticuerpos o antígenos en una muestra. Esta prueba serológica detecta en particular los anticuerpos producidos por el organismo en respuesta a la contaminación viral.
Principio de la prueba ELISA para enfermedades infecciosas
El uso de anticuerpos para el diagnóstico de enfermedades infecciosas representa un método específico y rápido. La técnica ELISA es una técnica inmunoenzimática que permite visualizar, a partir de una muestra biológica, las reacciones entre un antígeno - un cuerpo considerado como extraño por el organismo vivo - y un anticuerpo mediante una reacción de color producida por un marcador enzimático - generalmente fosfatasa alcalina y peroxidasa, previamente unidas al anticuerpo. La reacción de color confirma la identificación de la bacteria aislada o la presencia del virus deseado y la intensidad del color da una indicación de la cantidad de antígenos o anticuerpos en la muestra dada.
Los diferentes tipos de pruebas ELISA
Hay cuatro tipos principales de prueba ELISA:
- ELISA directo, permite detectar o medir anticuerpos. Solo usa un anticuerpo primario;
- ELISA indirecto, el más utilizado, también permite detectar o ensayar anticuerpos. Utiliza un anticuerpo secundario que le da mejor sensibilidad que el ELISA directo;
- ELISA en competición, permite la dosificación de antígenos. Producido por competencia por enlaces, no utiliza una enzima;
- ELISA «en sandwich», permite la dosificación de antígenos. Esta técnica se usa comúnmente en la investigación.
Usando la prueba ELISA
La prueba ELISA se utiliza para:
- Encontrar y medir anticuerpos en serología para el diagnóstico de enfermedades infecciosas: virología, parasitología, bacteriología, etc .;
- Dosis de proteínas a bajas concentraciones: dosis específicas de determinadas proteínas plasmáticas (inmunoglobulina E (IgE), ferritina, hormonas proteicas, etc.), marcadores tumorales, etc.
- Dosificar pequeñas moléculas: hormonas esteroides, hormonas tiroideas, fármacos ...
Los casos más comunes: Covid-19, Dengue, VIH, Lyme, alergias, embarazo
La prueba ELISA se utiliza en particular para diagnosticar muchas enfermedades infecciosas:
Enfermedades de transmisión sexual (ETS)
Incluyendo hepatitis, sífilis, clamidia y VIH. Recomendado por las autoridades sanitarias, es la principal prueba de detección del sida: muestra la presencia de anticuerpos anti-VIH y del antígeno p24 seis semanas después de la infección.
Enfermedades regionales o endémicas
Fiebre amarilla, enfermedad por virus de Marburg (MVM), Ladengue, enfermedad de Lyme, Chikungunya, fiebre del Valle del Rift, Ébola, fiebre de Lassa, etc.
El Covid-19
Para realizarse más de 2 a 3 semanas después del inicio de los síntomas, la prueba ELISA permite identificar, en menos de una hora, la presencia de anticuerpos anti-SARS-CoV-2.
Patógenos virales que causan infecciones prenatales.
Toxoplasmosis, rubéola, citomegalovirus, herpes simple, por ejemplo.
Otros casos
Pero también ha encontrado aplicaciones en la detección:
- Embarazos;
- Enfermedades autoinmunes;
- Alérgenos alimentarios: la determinación cuantitativa de inmunoglobulinas E totales (IgE) ayuda en la evaluación y el tratamiento de las alergias;
- Alteraciones hormonales;
- Marcadores tumorales;
- Virus de plantas;
- ¡Y muchos más!
Fiabilidad de la prueba Covid-19
Como parte de la detección de anticuerpos anti-SARS-CoV-2, un estudio piloto realizado en agosto de 2020 por el Institut Pasteur, el CNRS, Inserm y la Universidad de París confirma la fiabilidad de la prueba ELISA: ambas pruebas ELISA probaron el uso la proteína N completa de SARS-CoV-2 (ELISA N) o el dominio extracelular del pico (S) del virus como antígenos diana. Esta técnica permitiría identificar anticuerpos en más del 90% de los casos, con una tasa de falsos positivos muy baja del 1%.
Precio y reembolso de la prueba ELISA
Realizadas en laboratorios de análisis por prescripción médica, las pruebas de Elisa cuestan alrededor de 10 euros y son reembolsadas al 100% por el Seguro de Salud.
Realizados en centros gratuitos de información, cribado y diagnóstico (CeGIDD), pueden ser gratuitos para VIH y SARS-CoV-2.